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一分钟带你了解SRB检测试剂盒
发布时间:2019-04-04   点击次数:92次
  一分钟带你了解SRB检测试剂盒
 
  SRB是一种厌氧的微生物。广泛存在于土壤、海水、河水、地下管道以及油气井等缺氧环境中。虽然从理论上讲,SRB为严格的厌氧菌,但随着研究的深入,已有研究结果表明SRB并非严格意义上的绝对厌氧,而是兼性厌氧。
 
  但总体上来说,SRB对氧还是极其敏感的,因此对其培养与分离关键要采用严格的厌氧技术培养SRB不仅仅要求周围生长的环境是无氧的,还有培养基中氧化还原电位必须在-100mV以下。
 
  所以通常在培养基中加入一些强还原剂,如巯基乙醇、抗坏血酸、L2半胱氨酸盐酸盐,这些物质受热容易分解,所以要采用过滤除菌的方法单独灭菌。
 
  SRB检测试剂盒的检测原理:
 
  SRB检测试剂盒采用双抗体夹心法酶联免疫吸附试验,往预先包被SRB捕获抗体的包被微孔中,依次加入检测抗体,经过温育并彻底的清洗。用底物TMB着色,TMB会在过氧化物酶的作用下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的SRB呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度,计算样品浓度。
 
  SRB检测试剂盒的样品收集、保存方法及处理办法:
 
  1、血清:采用的是不含内毒素和热原的试管,操作过程中要注意不能受到任何细胞刺激,收集血液后,使用离心机3000转功率10分钟将血清和红细胞小心且迅速地分离。
 
  2、血浆:EDTA、肝素抗凝和柠檬酸盐。使用离心机3000转功率工作30分钟后取上清。
 
  3、细胞上清液:使用离心机3000转功率工作10分钟去除聚合物和颗粒。
 
  4、组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。使用离心机3000转功率工作10分钟取上清。
 
  5、保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分开手机保存,存放于-20℃的环境之中,避免反复冻融,在室温下进行解冻样品。
 
  SRB检测试剂盒操作的注意事项:
 
  1、SRB检测试剂盒要保存在2-8℃的环境当中,使用前在室温下放置20分钟。从冰箱取出之后,浓缩洗涤液会出现结晶,这是正常的现象,需要等到水浴加热使结晶完全溶解后使用。
 
  2、实验中不用的板条要马上放回自封袋中,密封储存。
 
  3、经过预处理后的样本不需要再进行稀释,直接取10μL加样即可。
 
  4、严格按照说明书中的加液量、时间进行温育操作。
 
  5、所有液体组分使用前要进行充分的摇匀。

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